人雙氫睪酮（DHT）ELISA試劑盒檢測方法

貨號：WT-E2706    【人雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒檢測方法】ELISA試劑盒規格：48T/96T

上海蔚霆生物公司專業銷售美國 DRG R&D 、標準品，對照品，生物試劑，科研抗體，細胞株等，生物耗材等，還代理了sigma,R&D,ScienCell,ATCC,wak0,omega，Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類公司的產品。ELISA試劑盒規格為96T和48T，中英文雙版說明書，適用于人及各種動物種屬小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、雞、馬、猴、羊、豬、牛等等種屬標本課題待檢樣本：體液，血清，血漿，細胞培養上清液，尿液，組織勻漿,心房水標本等等。并且還提供免費代檢測服務。（為您節省時間）。如需訂購，請點擊左上角的()進行咨詢

【人雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒檢測方法】操作步驟

1標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為（600 ng/L，400ng/L ，200ng/L，100 ng/L，50 ng/L）。

2：加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3：溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

4：配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5：洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6：加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

【人雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒檢測方法】7：溫育：操作同3。

8：洗滌：操作同5。

9：顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10：終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11：測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

【人雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒檢測方法】注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，*使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 嚴格按說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準

6．底物請避光保存。

7．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

檢測范圍：（請：）

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