產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
| 人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 | |||||||
| 信帆生物是一家專業(yè)的elisa試劑盒供應商,銷售各種進口和國產(chǎn)品牌的elisa試劑盒。對于elisa試劑盒,我們提供*的質(zhì)量,專業(yè)的技術解答,耐心周到的售后服務,成為國內(nèi)多家科研機構和高校的試劑盒供應商。 | |||||||
| 本試劑盒含量是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關系 | |||||||
| 人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 | |||||||
| 試劑樣本收集和處理方法 | |||||||
| 在收集樣本前都必須有一個計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,-70℃凍存?zhèn)溆谩吮緫苊夥磸蛢鋈凇?/td> | |||||||
| 液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。 | |||||||
| 1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。 | |||||||
| 2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 | |||||||
| 3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參? 照此實行。 | |||||||
| 4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。 | |||||||
| 5.培養(yǎng)細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 | |||||||
| 6.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 | |||||||
| 7.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. | |||||||
| 8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根氧化物酶的(HRP)活性。 | |||||||
| 人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 | |||||||
| 詳細操作步驟 | |||||||
| 1. 加樣:標準品設定5個濃度點10個孔,每個濃度設定平行孔,加入50微升不同濃度的標準品,空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔,在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 | |||||||
| 2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 | |||||||
| 3. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。 | |||||||
| 4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 | |||||||
| 5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 | |||||||
| 6. 溫育:操作同3。 | |||||||
| 7. 洗滌:操作同5。 | |||||||
| 8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. | |||||||
| 9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。 | |||||||
| 10. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。 | |||||||
| 試劑盒操作過程中有什么注意事項 | |||||||
| 1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。 | |||||||
| 2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。 | |||||||
| 3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,使用排槍加樣。 | |||||||
| 4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 | |||||||
| 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 | |||||||
| 6. 底物請避光保存。 | |||||||
| 7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準. | |||||||
| 8. 樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 | |||||||
| 9. 本試劑不同批號組分不得混用。 | |||||||
| 11. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。 | |||||||
| 計算方法 | |||||||
| 操作完成之后,詳細的計算方式是:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 | |||||||
| 人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 | |||||||
| 相關產(chǎn)品: | |||||||
| 大鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠CD40配體 (CD40LG)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠CD4分子(CD4)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠D-乳酸(D-Lactate)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠IL-17家族(17 25 27 17F)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠I型膠原(COL-I)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠L-半胱氨酸(L-cysteine)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠Runt相關基因2(RUNX2)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠SCD1ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠α1-微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 | |||||||
| 大鼠白介素25(IL-25)ELISA試劑盒 |






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